16 de mai. de 2010

BANCADA: Albumina (Labtest, 2005).

A albumina é uma proteína de alto valor biológico presente principalmente na clara do ovo, no leite e no sangue, sendo a principal proteína do plasma sanguíneo, sendo sintetizada no fígado pelos hepatócitos.

Fig. 1 Estrutura tridimensional da Albumina.

No kit ALBUMINA Cat. 19, a determinação deste componente sérico é por reação de ponto final. Por albumina ter propriedades de se ligar à uma grande gama de ânions orgânicos e moléculas complexas de corante, o sistema de medição baseia-se no desvio do pico de absortividade máxima de um corante complexo – o Verde de Bromocresol (VBC) – quando se liga à albumina. A cor formada é medida colorimetricamente entre 620 a 640 nm, sendo proporcional à quantidade de albumina na amostra até a concentração de 6,0 g/dL.

O VBC também chamado de Tetrabromometacresolsulfonoftaleína (fig. 2) é um composto químico utilizado principalmente como corante indicador, de aparência sólida, em forma de cristais, de cor amarelo claro e inodoro. É um composto tóxico e deve-se evitar a sua inalação, como o contato com a pele e olhos.

Fig. 2. Estrutura molecular do Tetrabromometacresolsulfonoftaleína, ou simplesmente verde de bromocresol.

Ele possui especificidade para a albumina, tendo uma excelente correlação com o fracionamento eletroforético em acetato de celulose e é facilmente aplicável à maioria dos analisadores semi-automáticos e automáticos capazes de medir uma reação de ponto final entre 625 e 640 nm.

A metodologia utilizada por este kit (fig. 3) é o Verde de Bromocresol, tendo no kit um frasco de reagente de cor que contém o tampão misturado com o verde de bromocresol, identificado pelo frasco n. 1. No frasco n. 2 há o padrão 3,8 g/dL, que é albumina bovina e azida sódica (fig. 4).

 Albumina Fig. 3. Caixa do Kit ALBUMINA do fabricante LABTEST.

Precauções recomendadas: Evitar a contaminação dos reagente por natureza química ou microbiológica que reduzem a estabilidade dos mesmo. E para o técnico a preocupação com a BIOSSEGURANÇA, então utilize EPI´s.

ALB kitFig. 4. Componentes do kit de ALBUMINA da Labstest, à esquerda o reagente de cor identificado como frasco n. 1. De tampa verde, identificado com a numeração 2, o padrão do kit.

AMOSTRA: Não usar plasma e sim soro sanguíneo.

POSSÍVEIS INTERFERÊNCIAS: Bilirrubinas acima de 38 mg/dL, hemoglobina acima de 180 mg/dL e triglicérides acima de 250 mg/dL que produzem diferenças significativas positivas.

INFLUÊNCIAS PRÉ-ANALÍTICAS: Relatado em pacientes que possuam obesidade, o valor de albumina tender a ser mais baixo. Torniquetes por mais de 3 minutos provocam o aumento do valor da albumina. Amostras obtidas com heparina de lítio e oxalato de potássio combinado  com fluoreto de sódio fornecem resultados falsamente diminuídos.

PROCEDIMENTOS: Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:

 

BRANCO

TESTE

AMOSTRA

Reagente de cor (n. 1)

1,0 mL

1,0 mL

1,0 mL

Amostra

----

0,01 mL

----

Padrão

----

----

0,01 mL

Misturar e após 2 minutos, no máximo 10 minutos, determinar as absorbâncias do teste e padrão em 630 nm (no espectrofotômetro – fig. 5) ou filtro vermelho (600 a 640) acertando o zero com o branco.

espectrofotometro Fig. 5. Espectrofotômetro presento na sala H119, da Universidade de Uberaba – UNIUBE.

O volume mínimo para leitura fotométrica é de 1,0 mL, em casos de redução dos volumes é fundamental a atenção porque pode haver um aumento da imprecisão da medição.

CÁLCULOS:

ALBUMINA (g/dL) = (Abs. do teste / Abs. do padrão) X 3,8

Exemplo: Abs. do teste = 0,242 e Abs. do padrão = 0,302

ALBUMINA (g/dL) = (0,242 / 0,302) X 3,8 = 3,0 g/dL

A reprodutibilidade pode ser obtida pela seguinte conta, conforme recomendada pelo fabricante:

Fator de Calibração = 3,8 / Abs. do padrão

ALB (g/dL) = Absorbância do teste X fator de calibração

Exemplo:

FATOR: 3,8 / 0,302 = 12,6 g/dL

ALB (g/dL) = 0,242 X 12,6 = 3,0 g/dL.

OS DETALHES SOBRE O KIT ALBUMINA cat. 19 PODEM SER OBTIDOS NO SITE DA LABTEST: http://www.labtest.com.br.

REFERÊNCIA: ALBUMINA. Responsável técnico LABTEST DIAGNÓSTICA S.A. Lagoa Santa: LABTEST, 2005. Bula do kit colorimétrico.

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